目的：了解某地三甲医院食堂从业人员食品安全相关知识的掌握现况，有针对性地对食堂餐饮从业人员进行食品安全知识培训和教育，探索适合食堂从业人员食品安全知识培训的干预方法，为提高餐饮从业人员食品安全知识具体实施措施提供参考。方法：参考相关文献及规定自行设计调查问卷，使用网络“问卷星”调查方式，对江苏省某三甲医院食堂在岗的123名餐饮从业人员进行问卷调查，并开展多种形式的食品安全知识培训与教育干预，3个月后再次进行同样的问卷调查，并对调查结果进行统计学分析。结果：通过开展食品安全知识培训与教育活动能有效提高餐饮从业人员食品安全相关知识，干预前后对相关知识掌握及合格率的对比有显著性差异。在对调查对象多因素线性回归分析中显示，性别、年龄、文化程度、工作年限对食品安全知识得分间差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：有针对性地开展多种形式的食品安全相关知识培训和教育能有效提高医院食堂的餐饮从业人员对食品安全相关知识掌握程度，有利于改善餐饮从业人员食品安全行为，最终达到保障食品安全的目的。